血吸虫的种群遗传学探讨需要大量的虫体基因组DNA。由于埃及血吸虫主要感染人类,因而很难从实验动物体内获得没有遗传偏离的基因组DNA。本文作者通过以单只毛蚴感染球水泡螺(B训i舭晒∥06∞“s)而后逸出大量尾蚴的措施获取足够的埃及血吸虫DNA,然后再用f己APD/PCR略论其遗传多态性。 自津巴布韦近郊乡村学校的儿童中收集尿液,分离埃及血吸虫卵。卵经盐水漂洗后置去氯水中孵出毛蚴,再以单只毛蚴感染新近自津巴布韦和瑞士采集的球水泡螺。两地采集的螺经实验证实对埃及血吸虫感染同样敏感。感染后不同时间逐一逸出尾蚴。收集尾蚴,每25条为一组,经异丙醇漂洗后置微量离心管中保存备用。若作PCR扩增,需先在真空中去除异丙醇,然后加入蛋白酶K消化,37℃2小时后加热,灭酶活性。测量DNA的浓度为1.5 ng乍l,再加入PCR扩增反应混合液,Perkin.Elmer扩增仪上进行扩增。所有的反应均重复进行,以确保可重复性。25个随机扩增引物经重复性和清晰性筛选,从中得到5个满足要求的引物。以上述5个引物进行m,反应结束后取3.5肛l产物进行聚丙烯酰胺电泳。电泳完毕后,胶星(Gels......(论文页数是:2页) ,阿拉伯语论文网站,阿拉伯语论文题目 |