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【摘要】：江苏省部分啤酒大麦麦芽的品质相关于进口优质大麦麦芽存在着较大差距，尤其在过滤性能方面。本文采用比较蛋白质组学的措施，比较了过滤性能差的单二（江苏啤酒大麦主要种植品种之一）麦芽和过滤性能优的进口啤酒大麦（Metcalfe）麦芽的蛋白质组异同，进而对其中异同较显著的阿拉伯呋喃糖苷水解酶I （Arabinoxylanarabinofuranohydrolase I，阿拉伯语论文范文，AXAH-I）进行了分离纯化及酶学性质探讨，同时探讨了其对江苏啤酒大麦麦芽过滤性能的作用。
通过基于荧光异同双向凝胶电泳的比较蛋白质组学技术探讨发现单二与Metcalfe麦芽中异同较大的为参与物质代谢的蛋白质和病程相关蛋白质，其中异同较大的AXAH-I在Metcalfe与单二麦芽中的标准丰度比值高于2，单二麦芽中AXAH的活力相当于Metcalfe中的60.5%。
通过硫酸铵分级沉淀、HiTrap16/10SP FF阳离子交换层析、HiPrep16/10Q FF阴离子交换层析和HiPrep16/60Sephacryl S-100HR凝胶层析等对江苏单二麦芽中的AXAH-I进行了分离纯化，并采用SDS-PAGE和质谱略论法（MS/MS）进行了蛋白质鉴定。采用圆二色谱法（CD）对AXAH-I的二级结构进行测定，发现α-螺旋是最主要的二级结构单元。纯化的AXAH-I比活力为111.11mU mg-1，纯化倍数为99.21，回收率为12.00%。酶学性质探讨发现，纯化酶的最适影响pH为4.5，pH4.0~6.0范围内较稳定；最适影响温度为55℃，30~55℃范围内较稳定。Mn2/对该酶具有较好的促进影响，而Fe2/和Cu2/对该酶的抑制影响较大。动力学探讨得到AXAH-I的米氏常数Km=0.46mg mL-1。
纯化得到的AXAH-I添加到协定糖化过程中，可有效加快麦汁的过滤速度。当加酶量达到6mU g-1时，阿拉伯语论文题目，协定麦汁的过滤速度提高了34.2%，麦汁粘度降低了5.5%，浊度升高了32.5%，PAX的含量降低了6.7%，A/X比值降低了31.0%。选择AXAH-I、β-淀粉酶与酶制剂三因素二水平进行正交略论实验，当添加0.4mg g-1的商品酶制剂、40.0U g-1的β-淀粉酶和6.0mU g-1的AXAH-I时，麦汁的过滤速度加快了81.4%，麦汁的浊度和粘度分别降低了48.5%和7.3%。
【关键词】：阿拉伯呋喃糖苷水解酶 啤酒大麦麦芽 江苏 比较蛋白质组学 过滤性能
摘要3-4 Abstract4-7 第一章 绪论7-14 1.1 江苏啤酒大麦麦芽的过滤性能问题7 1.2 大麦麦芽过滤性能的作用因素7-10 1.2.1 麦芽中的大分子物质及其相关酶系的作用7-8 1.2.2 大麦品种的作用8-9 1.2.3 制麦和糖化工艺的作用9-10 1.3 比较蛋白质组学及其在啤酒行业中的运用10-11 1.3.1 比较蛋白质组学技术10-11 1.3.2 比较蛋白质组学技术在啤酒行业中的运用11 1.4 阿拉伯呋喃糖苷水解酶11-12 1.5 探讨背景与意义12-13 1.6 主要探讨内容13-14 第二章 材料与措施14-20 2.1 材料14-15 2.1.1 主要材料与试剂14 2.1.2 仪器设备14-15 2.2 措施15-20 2.2.1 大麦麦芽及其协定糖化麦汁指标的测定15 2.2.2 大麦麦芽中活性蛋白质的提取15 2.2.3 荧光异同凝胶双向电泳（2D-DIGE）实验15-16 2.2.4 AXAH-I 的活性测定16 2.2.5 麦芽中 AXAH-I 的分离纯化16-17 2.2.6 AXAH-I 的二级结构略论17 2.2.7 AXAH-I 的酶学性质探讨17-18 2.2.8 糖化过程中 AXAH-I 的添加实验18 2.2.9 不同糖化工艺下 AXAH-I 对麦芽过滤性能的作用18-20 第三章 结果与讨论20-42 3.1 不同品种大麦麦芽中活性蛋白质组的略论20-25 3.1.1 不同品种大麦麦芽的过滤性能略论20-21 3.1.2 不同品种麦芽中活性蛋白质组的略论比较21-24 3.1.3 不同品种麦芽中异同显著蛋白质 AXAH-I 的略论24-25 3.2 大麦麦芽中 AXAH-I 的分离纯化及其酶学性质探讨25-34 3.2.1 AXAH-I 的分离纯化25-31 3.2.2 AXAH-I 的结构略论31 3.2.3 AXAH-I 的酶学性质探讨31-34 3.3 AXAH-I 对麦芽过滤性能的作用探讨34-42 3.3.1 协定糖化过程中 AXAH 的酶活力变化34-35 3.3.2 协定糖化过程中添加 AXAH-I 的探讨35-37 3.3.3 糖化过程中添加 AXAH-I、β-淀粉酶和啤酒复合酶制剂的探讨37-39 3.3.4 不同糖化工艺下 AXAH-I 对大麦麦芽过滤性能的作用39-42 主要结论与展望42-43 主要结论42 |
