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【摘要】：
自1992年引进我国以来,大菱鲆已发展成为我国北方沿海的一种重要经济养殖鱼类。但由于在苗种引进时受欧洲等苗种供应商的限制,及我国苗种生产过程中缺乏适当的育种规划,近交衰退的情况比较严重。因此,急需开展大菱鲆优良种质的培育工作。本探讨对两个大菱鲆养殖群体--西班牙群体(S)和英国群体(E)的杂交子一代的杂种优势进行了探讨,并利用AFLP技术从DNA水平上略论了杂种优势产生的原因。主要结果如下:
1、对两个大菱鲆养殖群体的杂交效果进行了略论。采用完全双列杂交法对两个大菱鲆养殖群体--西班牙群体(S)和英国群体(E)进行群体间杂交及群体内自繁,得到了S♂×S♀、E♂×E♀、S♂×E♀和E♂×S♀4个组合的子一代。并对各交配组合的受精率、孵化率、畸形率、30日龄和70日龄稚鱼的体长、质量等指标进行了比较。结果表明:杂交组与自繁组在受精率、孵化率及畸形率等方面不存在显著性异同;但杂交组在30日龄和70日龄稚鱼的体长、质量方面,与自繁组相比表现出不同程度的杂种优势。S♂×E♀组30日龄体长的杂种优势达到5.43%,E♂×S♀组70日龄质量的杂种优势达到25.00%。实验初步显示,不同养殖群体间的杂交可有效地改良大菱鲆的生长性状。
2、对AFLP反应条件进行摸索,略论了DNA提取、双酶切反应、连接反应、预扩增反应、选择性扩增反应、银染等步骤进行了略论。结果表明,用EcoRI/MseI双酶切、核心序列加3个选择性碱基的选择性扩增引物、1:6 (w:w)的EcoRI端与MseI端选择性扩增引物比和20μl选择性扩增体积,可得到十分稳定的结果。所得产物经电泳和银染后可获得条带清晰、背景干扰小的图像。扩增片段长度多态性(AFLP)技术是略论大菱鲆群体遗传变异的有效技术之一。
【关键词】：大菱鲆 AFLP 杂交 杂种优势
独创声明3 学位论文版权使用授权书3-4 摘 要4-6 ABSTRACT6-11 1 前言11-38 1.1 DNA分子标记技术及其运用11-26 1.1.1 遗传标记及其发展11-12 1.1.2 形态学标记12 1.1.3 细胞学标记12-13 1.1.4 生化标记--同工酶标记13 1.1.5 分子标记13-14 1.1.6 常用分子标记技术及原理14-20 1.1.7 AFLP标记的原理、发展及运用20-26 1.2 杂交及杂种优势26-31 1.2.1 杂种优势的遗传机理27-29 1.2.2 杂种优势的预测29-31 1.3 大菱鲆及其探讨概况31-37 1.3.1 大菱鲆的生物学概况32-35 1.3.2 大菱鲆探讨进展35-37 1.4 本探讨的目的和意义37-38 2 双列杂交法略论两个大菱鲆养殖群体的杂交效果38-47 2.1 材料与措施38-41 2.1.1 亲鱼来源38 2.1.2 实验措施38-39 2.1.3 人工授精和受精卵孵化39 2.1.4 仔鱼培育39-40 2.1.5 数据测定40 2.1.6 杂种优势略论措施40 2.1.7 母性效应略论措施40 2.1.8 数据处理40-41 2.2 结果41 2.2.1 不同组合各性状统计量和杂种优势率41 2.2.2 单因素方差略论结果41 2.2.3 母性效应和母体表现对比41 2.3 讨论41-47 2.3.1 杂种优势的性状表现41-42 2.3.2 杂种优势的时空表达42 2.3.3 母性效应的作用42-47 3 AFLP略论技术在大菱鲆中的运用47-60 3.1 材料与措施48-51 3.1.1 材料48 3.1.2 措施48-51 3.2 结果51-52 3.2.1 基因组DNA51 3.2.2 基因组DNA双酶切结果51 3.2.3 选择性扩增结果51-52 3.3 讨论52-60 3.3.1 基因组DNA52-53 3.3.2 双酶切及连接反应53 3.3.3 预扩增产物稀释倍数53 3.3.4 引物浓度及浓度配比53-54 3.3.5 引物组合对选择性扩增的作用54 3.3.6 银染细节的完善54-60 4 两个大菱鲆养殖群体子一代杂种优势的AFLP略论60-67 4.1 材料与措施61-62 4.1.1 材料61 4.1.2 措施61-62 4.2 结果62-65 4.2.1 AFLP反应结果62-63 4.2.2 子一代4 个组合的群体内遗传变异及群体间遗传距离63-65 ，西语专业论文，西语论文网站 |
