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【摘要】：本探讨的目的是建立西罗莫司的灵敏、专属、快速的LC-MS/MS略论措施,用于全血和组织中西罗莫司的定量测定以及临床前药物动力学探讨,为临床药代动力学的探讨提供参考。本论文第一章概述了课题探讨的背景和意义,冠状动脉粥样硬化性心脏病简称冠心病,严重威胁现代人类的身心健康,带来沉重的社会公共卫生负担。目前,冠心病的治疗主要包括药物治疗、冠状动脉旁路移植术和经皮冠状动脉介入治疗三种方式。其中,经皮冠状动脉介入治疗技术于上世纪七十年代运用于临床,经过几十年的发展,现已成为冠心病治疗中最重要的手段之一。然而,介入治疗术后支架内再狭窄一直是作用其远期治疗效果的主要因素,而随着自2002年包括西罗莫司洗脱支架在内的药物洗脱支架问世以来,冠状动脉支架内再狭窄的发生率显著降低,从而极大地改善了介入治疗术的远期疗效,在治疗冠心病领域有着良好的效果和运用前景。此外,科学家们也仍在不断探讨新的制剂和给药方式来提高西罗莫司的生物利用度和治疗效果。随着探讨的深入,为了尽可能的保证治疗效果和减少不良反应的发生,关于西罗莫司在体内的药动力学性质的探讨就显的十分重要。而要评价药动学性质,就需要建立更加高效、灵敏、快速且专属性强的生物样品略论措施。本论文第二章对液相色谱串联质谱技术定量略论全血和组织中西罗莫司的措施进行了探讨。实验中优化了液相色谱分离、质谱略论、样品预处理措施等实验条件,建立了一系列简单易行、灵敏度较高且具有良好的特异性和重现性、能同时适用于定量略论西罗莫司在多种生物基质中的大量生物样本的LC-MS/MS略论措施。该措施测定西罗莫司在全血中浓度的定量范围为50-10000 pg/ml,在组织匀浆液中的的定量范围为50-25000 pg/ml.测定西罗莫司在猪全血,冠脉,心肌,肝脏,肾脏,肺和脾匀浆液中的日内、日间精密度(RSD)分别小于12.2%,11.9%,5.7%,6.1%,4.5%,5.1%,7.9%。测定准确度(RE)分别在-11.0%-4.7%,-7.2%～0.6%,0.9%-6.4%,-8.9%-0.0%,-4.7%-10.0%,-2.6%10.0%,-3.6%-5.8%范围内；测定西罗莫司在大鼠全血中的日内、日间精密度(RSD)小于12.1%,测定准确度(RE)在-1.6%-13.6%范围内;测定西罗莫司在人全血中的日内、日间精密度(RSD)小于6.6%,测定准确度(RE)在-0.80/0～14.3%范围内。本探讨所建立的LC-MS/MS略论措施灵敏、专属、快速,可用于定量测定西罗莫司在全血和组织中浓度和临床前药物动力学探讨,为临床药物动力学探讨提供重要参考。
【关键词】：液相色谱-质谱串联法 西罗莫司 全血 组织
摘要5-6 ABSTRACT6-8 第一章 绪论8-20 1. 冠心病的探讨8-11 1.1 经皮冠状动脉介入治疗简介8-9 1.2 药物洗脱支架简介9 1.3 西罗莫司9-11 2. 西罗莫司检测措施综述11-17 2.1 大环内酯类药物浓度的测定13-15 2.2 西罗莫司现有的测定措施15-17 2.3 现有测定措施存在的问题17 3. 本论文探讨的内容及意义17-20 第二章 LC-MS/MS法定量测定全血和组织中西罗莫司20-89 1. 引言20 2. 实验措施及结果20-85 2.1 仪器和试剂20-21 2.1.1 仪器20-21 2.1.2 试剂21 2.2 溶液配制21-24 2.2.1 标准品储备液的配制21 2.2.2 标准曲线溶液的配制21-22 2.2.3 质量控制样品溶液的配制22-23 2.2.4 内标溶液的配制23 2.2.5 参比溶液的配制23-24 2.3 生物样品中西罗莫司LC-MS/MS略论措施的建立24-53 2.3.1 质谱条件的建立24-26 2.3.2 色谱条件的建立26-33 2.3.3 组织样品预处理措施33-41 2.3.4 全血样品预处理措施41-45 2.3.5 内标的选择45-53 2.4 生物样品中西罗莫司LC-MS/MS略论措施的确证53-79 2.4.1 措施的选择性53-54 2.4.2 标准曲线和线性范围54-55 2.4.3 措施的定量检测下限55 2.4.4 措施的精密度和准确度55-66 2.4.5 基质效应66-69 2.4.6 提取回收率69-71 2.4.7 稀释可靠性71-72 2.4.8 样品的稳定性72-77 2.4.9 储备液的稳定性77-78 2.4.10 措施验证总结78-79 2.5 西罗莫司在小型猪体内的药代动力学探讨79-85 2.5.1 受试动物的选择79 2.5.2 药物洗脱支架79-80 2.5.3 动物模型建立以及手术过程80 2.5.4 未知样品略论80-82 2.5.5 数据处理82 2.5.6 药动学运用讨论82-85 3. 实验结果讨论85-87 ，西语专业论文，西语论文网站 |
