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【摘要】：泰拉霉素作为新型兽医专用的大环内酯类药物以其给药后吸收迅速、生物利用度高等特点而被广泛用于临床。药物使用可能会在动物源性食品内残留,从而通过食物链危害人体健康。本文建立了血浆、鸡肉、肝脏和肾脏中泰拉霉素药物残留的高效液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)检测法,进一步探讨该药物在鸡体内药代动力学规律及其安全性。血浆样品加入乙腈,混匀后直接离心,组织样品经乙腈提取,正己烷去脂,LC-SCX柱净化,5%氨水甲醇溶液洗脱,以Luna C18(2)色谱柱分离,用乙腈和0.1%甲酸水溶液为流动相进行等度洗脱,电喷雾正离子模式(ESI/)电离,多反应监测模式(MRM)检测,外标法定量。结果显示:泰拉霉素在2~200μg/kg(μg/L)的范围内线性良好,相关系数R2均大于0.9900。泰拉霉素在血浆、肌肉、肝脏、肾脏样品中的检出限依次为0.8、0.5、0.8、0.5μg/kg(μg/L),定量限依次为2.0、1.0、2.0、1.0μg/kg(μg/L)。日内RSD为5.0%~9.2%;日间相RSD为5.2%~12.7%。该措施简便、快速、准确,可用于鸡组织中泰拉霉素药物残留的确证和定量检测。鸡单剂量静注、肌注及内服给药后,定时采集血浆、肌肉、肝脏、肾脏,用建立的LC-MS/MS法进行测定,采用WinNonlin非房室模型略论措施。非房室模型的略论表明:静脉注射给药后,血浆清除率(CL)为17.71 mL/kg/h,稳态表观分布容积(Vss)为77.15 L/kg,消除半衰期(t1/2)为21.65 h。肌肉注射和内服泰拉霉素后,分别在0.25 h和0.5 h,血浆浓度达峰值,Cmax分别为0.83 ng/mL、0.69 ng/mL,血浆中平均消除半衰期分别为20.96 h、24.33h。生物利用度分别为92.5%、62.38%。30只健康罗曼鸡给药前临床表现正常,未观察到异常反应。泰拉霉素治疗剂量组(20 mg/kg.b.w)、3倍治疗剂量组(60 mg/kg.b.w)和5倍治疗剂量组(100 mg/kg.b.w)的给药后进行临床观察、增重率、脏器系数、生化指标、病理组织学鉴定5项安全性试验指标的测定。略论结果表明泰拉霉素各给药组的鸡临床表现正常,无任何不良反应;不同治疗剂量组体重平均增重率与对照组组之间均无显著性异同(P0.05);各脏器质量及脏器指数与对照组相比异同不显著(P0.05);血清生理生化指标检测发现,在给药至第7天BUN和CREA有暂时性的减少,随后恢复正常。泰拉霉素各给药组的ALB、TP、GOP和GPT与空白组比较异同均不显著(P0.05);组织病理学观察,泰拉霉素对鸡的肺脏、心脏、肝脏、肾脏、脾脏、等各组织均无明显的病理学作用。探讨结果表明泰拉霉素对鸡无明显毒性影响,安全性高。
【关键词】：泰拉霉素 高效液相色谱-串联质谱 鸡 残留 药代动力学 评价
摘要4-6 Abstract6-12 中英文对照表12-13 文献综述13-22 引言22-23 1 材料与措施23-30 1.1 实验动物23 1.2 主要药品与试剂23 1.3 仪器设备23-24 1.4 主要溶液的配制24-25 1.4.1 标准储备溶液24 1.4.2 标准工作溶液24 1.4.3 流动相的配制24-25 1.5 试验分组与给药方案25 1.6 试验措施25-27 1.6.1 样品前处理措施25-26 1.6.2 质谱条件略论26 1.6.3 液相色谱条件略论26 1.6.4 药物在鸡体内代谢规律的探讨26-27 1.6.5 安全性探讨的措施27 1.7 实验措施的评价27-29 1.7.1 定性措施27 1.7.2 定量措施27-28 1.7.3 标准曲线的绘制和线性范围的测定28 1.7.4 回收率的测定28 1.7.5 精密度的测定28 1.7.6 检测限和定量限的测定28-29 1.7.7 稳定性观察29 1.8 数据处理29-30 2 结果与略论30-50 2.1 残留略论措施30-38 2.1.1 前处理正交试验结果30-31 2.1.2 质谱条件的优化结果31-33 2.1.3 液相色谱条件的优化结果33-34 2.1.4 措施的线性范围与检出限和定量限34 2.1.5 回收率和精密度34-38 2.2 药物在鸡体内的药动学规律38-41 2.3 泰拉霉素安全性探讨结果41-50 2.3.1 临床观察结果41 2.3.2 泰拉霉素对鸡体重变化的作用41 2.3.3 泰拉霉素对试验鸡各脏器系数的作用41-42 2.3.4 血液生理生化指标检测结果42-47 2.3.5 组织学检查结果47-50 3 讨论50-55 3.1 样品的提取和净化50 3.1.1 血浆样品50 3.1.2 组织样品50 3.2 质谱条件的优化50-51 3.3 色谱分离条件的优化51 3.4 泰拉霉素在鸡体内的药物代谢动力学规律51-52 3.4.1 泰拉霉素在鸡体内的药物代谢动力学特征51-52 3.4.2 泰拉霉素种属间药物代谢动力学比较52 3.5 泰拉霉素在鸡体内的安全性探讨52-55 3.5.1 泰拉霉素对临床表现的作用52 3.5.2 素拉霉素对鸡体重的作用52-53 3.5.3 泰拉霉素对鸡各脏器指数的作用53 3.5.4 泰拉霉素对鸡血清生化指标的作用53-54 3.5.5 泰拉霉素对试验动物器官组织的作用54-55 4 结论55-56 4.1 建立了泰拉霉素在鸡血浆和组织中的残留检测前处理措施55 4.2 建立了检测鸡组织中泰拉霉素药物残留的LC-MS/MS措施55 4.3 略论了泰拉霉素在鸡血浆中的药代动力学规律55 4.4 泰拉霉素对鸡体安全性高55-56 ，泰语专业论文，泰语论文范文 |
