【关键词】:德国小蠊 抗药性 高效氯氰菊酯 抗性选育 酶活力 血淋巴 sDs-PAGE 2D-PAGE 质谱 异同蛋白 生物适合度 卵巢 肠道菌 抗真菌活性
摘要7-10 Abstract10-14 英文缩写符号及中英对照表14-16 第一部分 文献综述16-37 1 德国小蠊的生物学特征16 2 德国小蠊抗药性发展概况16-18 3 杀虫剂类型及防治策略18-19 4 德国小蠊抗药性机制19-23 4.1 行为抗性19 4.2 代谢抗性19-21 4.2.1 酯酶(EST)20 4.2.2 谷胱甘肽转移酶20-21 4.2.3 细胞色素P450单加氧酶21 4.3 生理抗性21-23 4.3.1 表皮穿透性降低21-22 4.3.2 靶标抗性22-23 4.3.2.1 乙酰胆碱酯酶敏感性降低22 4.3.2.2 神经轴突钠离子通道的改变22-23 4.3.2.3 γ-氨基丁酸受体的改变23 5 德国小蠊对杀虫剂的抗性及适合度代价23-25 5.1 杀虫剂抗性对适合度的作用23-24 5.2 适合度代价的评价24-25 6 共生菌与昆虫之间的关系25-26 7 蛋白质组学在抗性探讨方面的运用26-28 参考文献28-37 第二部分 实验论文37-109 第1章 抗高效氯氰菊酯品系德国小蠊的培育37-42 1 材料与措施37-38 1.1 生物材料37 1.2 主要仪器37 1.3 试剂37-38 1.4 德国小蠊急性毒理试验38 1.5 抗性品系的选育38 1.6 抗性品系与其他杀虫剂交互抗性的测定38 1.7 统计略论措施38 2 结果38-40 2.1 德国小蠊敏感品系半数致死浓度38-39 2.2 德国小蠊抗高效氯氰菊酯品系的选育结果39 2.3 德国小蠊抗性品系与其他杀虫剂的交互抗性39-40 3 讨论40-42 第2章 高效氯氰菊酯对德国小蠊几种酶活性的作用42-49 1 材料与措施42-44 1.1 生物材料42 1.2 主要仪器42 1.3 试剂42 1.4 酶活性测定42-44 1.4.1 酶源制备42-43 1.4.2 超氧化物歧化酶(SOD)活性测定43 1.4.3 乙酰胆碱酯酶(AChE)活性测定43-44 1.4.4 谷胱甘肽-S-转移酶(GST)活力测定44 1.5 Bradford法测定蛋白质浓度44 1.6 统计略论44 2 结果44-46 2.1 德国小蠊超氧化物歧化酶(SOD)活性变化44-45 2.2 德国小蠊乙酰胆碱酯酶(AChE)活性变化45-46 2.3 德国小蠊谷胱甘肽S-转移酶(GST)活性变化46 3 讨论46-49 第3章 抗性品系和敏感品系德国小蠊全虫蛋白及血淋巴蛋白SDS-PAGE比较49-57 1 材料与措施49-52 1.1 生物材料49 1.2 主要仪器49 1.3 试剂49-50 1.4 蛋白提取措施50 1.4.1 全虫蛋白的制备50 1.4.2 血淋巴蛋白的制备50 1.5 Bradford法测定蛋白质浓度50-51 1.6 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)51-52 2 实验结果52-55 2.1 标准蛋白曲线52-53 2.2 全虫蛋白提取措施比较53-54 2.3 五种蛋白提取效果SDS-PAGE略论54 2.4 抗性品系和敏感品系蛋白SDS-PAGE略论结果54-55 3 略论与讨论55-57 第4章 2D-PAGE对德国小蠊抗药性相关蛋白的略论及质谱鉴定57-82 1 材料与措施57-61 1.1 生物材料57 1.2 主要仪器57 1.3 试剂57-58 1.4 血淋巴蛋白样品的制备58 1.5 Bradford法测定样品蛋白浓度58-59 1.6 固相双向电泳的操作59 1.7 银染措施59-60 1.8 图像扫描60 1.9 异同蛋白的质谱鉴定60 1.10 HPLC-ESI-MS-MS条件60-61 1.11 质谱略论61 2 实验结果61-78 3 讨论78-82 第5章 高效氯氰菊酯抗性对德国小蠊生物适合度的作用82-96 1 材料与措施82-84 1.1 生物材料82 1.2 主要仪器82-83 1.3 试剂83 1.4 生物学特性观察83 1.5 数据的统计略论83 1.6 卵巢蛋白样品的制备83 1.7 Bradford法测定样品蛋白浓度83 1.8 固相双向电泳的操作83 1.9 银染措施83 1.10 图像扫描83 1.11 异同蛋白的质谱鉴定83 1.12 HPLC-ESI-MS-MS条件83-84 1.13 质谱略论84 2 结果84-92 2.1 高效氯氰菊酯抗性对德国小蠊卵荚脱落率的作用84 2.2 高效氯氰菊酯抗性对德国小蠊幼虫羽化数的作用84-85 2.3 高效氯氰菊酯抗性对德国小蠊生长历期的作用85-86 2.4 高效氯氰菊酯抗性对德国小蠊雄雌比例的作用86 2.5 高效氯氰菊酯对德国小蠊成虫寿命的作用86-87 2.6 高效氯氰菊酯对德国小蠊成虫体重的作用87-88 2.8 德国小蠊抗性品系和敏感品系卵巢蛋白异同点88-92 3 讨论92-96 第6章 德国小蠊肠道菌群的组成及种群结构96-109 1 材料与措施96-99 1.1 生物材料96 1.2 主要仪器96 1.3 试剂96-97 1.4 抗性品系和敏感品系德国小蠊对白僵菌的感染率比较97 1.5 德国小蠊肠道菌的分离97 1.6 德国小蠊肠道菌的生理生化鉴定97 1.7 16S rDNA的PCR扩增、序列测定和细菌分类地位的确定97-98 1.8 德国小蠊肠道细菌抑真菌活性的鉴定98 1.9 肠道菌对菌丝生长的作用98 1.10 肠道菌发酵粗提物的获取98 1.11 肠道菌发酵粗提物对孢子发芽率测定98 1.12 肠道菌发酵粗提物的生物测定98 1.13 统计略论98-99 2 实验结果99-106 2.1 白僵菌对德国小蠊抗性品系和敏感品系的感染率比较99 2.2 德国小蠊肠道菌群的分离及鉴定99-101 2.3 德国小蠊肠道细菌抑制真菌结果101-102 2.4 16S rDNA序列测定和进化树的绘制102-105 2.5 孢子发芽率的测定105 2.6 对菌丝生长的作用105-106 2.7 发酵粗提物的生物测定106 3 讨论106-109 主要创新点和展望109-110 参考文献110-118 附录一:超氧化歧化酶(SOD)活性测定118-119 附录二:乙酰胆碱酯酶(AChE)活性测定119-121 附录三:谷胱甘肽S-转移酶(GSTs)活性测定121-123 期间论文情况123-124 ,德语论文范文,德语论文范文 |