(摘要内容经过系统自动伪原创处理以避免复制,下载原文正常,内容请直接查看目录。) 目标经由过程对哮喘模子小鼠腹腔打针重组德国小蠊变应原制剂Bla g 2(rBla g 2)停止免疫医治,商量重组卵白rBla g 2制剂在过敏性哮喘抗原特异性免疫医治中的疗效及机制。办法1、重组卵白rBla g 2变应原制剂的克隆、表达。2、18只雌性BALB/c小鼠随机分为3组,即正常对比组(A组)、哮喘模子组(B组)和重组卵白rBla g 2医治组(C组)。B、C两组用Al(OH)3佐剂乳化的重组卵白rBla g 2腹腔打针免疫,剂量为每次50μg/(只·次),共3次,每次距离1周。A组以心理盐水50μl取代变应原。末次致敏后2周,停止免疫医治,C组小鼠腹腔打针rBla g 2,100μg/(只·次),每2天1次,持续8次。A、B2组以磷酸盐缓冲液(PBS)100μl取代变应原。末次医治后1周,停止滴鼻激起,将一切小鼠麻醉后,B、C 2组以rBla g 2滴鼻,50μg/(只·次),天天1次,持续7天。A组以PBS取代变应原滴鼻。从第51天(激起第一天)开端,天天下昼4点在植物中间不雅察各组试验小鼠的症状和体征,到第57天停止。一切小鼠最初一次滴鼻24 h落后行以下各项检测。3、运用全身性体积描记法不雅察最初1次滴鼻24 h后各组小鼠雾化吸入PBS缓冲液和1、3、10、30、100 mg/ml乙酰甲胆碱后扩展间隙(Penh)值的变更,绘制呼吸曲线,不雅察气道Penh值的变更。4、各组小鼠气管插管停止支气管肺泡灌洗,显微镜下不雅察支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞总数和细胞分类。5、各组小鼠用ELISA试剂盒检测血清中IgE和IgG2a抗体。6、各组小鼠取肺组织,惯例HE染色不雅察小鼠肺的炎症变更。7、各组小鼠的肺组织经由过程免疫组化不雅察Bcl-2阳性嗜酸性粒细胞(EOS)的细胞数目变更。8、各组小鼠取脾组织,检测脾组织的TLR-2,4和PAR-2,4受体表达情形。成果1.与正常对比组比拟,哮喘模子组小鼠激起后可见喘气、呼吸加深加速、焦躁不安等症状;气道Penh值增长(P,德语毕业论文,德语论文范文 |